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1，溫度

　　利(lì)用(yòng)溫(wēn)度進行滅菌，消(xiāo)毒(dú)或防腐(fǔ)，是zui常(cháng)用(yòng)而(ér)又(yòu)方便有(yǒu)效的(dí)方法。高溫可使(shǐ)微生物細胞內的蛋白質(zhì)和酶(méi)類(lèi)發生變性(xìng)而失活，從(cóng)而起(qǐ)滅菌作(zuò)用，低溫(wēn)通(tōng)常(cháng)起抑(yì)菌作(zuò)用(yòng)。

１）幹熱滅(miè)菌(jūn)法:

　　a.灼(zhuó)燒(shāo)滅(miè)菌法(fǎ)：利用(yòng)火焰直接把(bǎ)微(wēi)生物燒死(sǐ)。此(cǐ)法(fǎ)可靠，滅菌迅速(sù)，但(dàn)易焚毀物(wù)品，所(suǒ)以(yǐ)使(shǐ)用(yòng)範圍(wéi)有(yǒu)限，隻適合(hé)於接種(zhǒng)針(zhēn)，環，試(shì)管(guǎn)口及(jí)不(bù)能用的(dí)汙(wū)染物(wù)品或(huò)實驗動(dòng)物的屍(shī)體(tǐ)等的(dí)滅菌(jūn)。

b.幹熱空(kōng)氣滅菌法(fǎ)：這是實驗(yàn)室中常用的(dí)一(yī)種方(fāng)法(fǎ)，即把(bǎ)待(dài)滅菌的物品(pǐn)均(jūn)匀地(dì)放(fàng)入烘(hōng)箱(xiāng)中，升溫至160°C，恒(héng)溫(wēn)1小時(shí)即可。

２）濕(shī)熱(rè)滅菌法(fǎ):

　　在同樣(yàng)的(dí)溫度(dù)下，濕熱滅菌(jūn)的效(xiào)果比幹(gān)熱滅菌好，這是(shì)因為(wéi)一(yī)方(fāng)麵(miàn)細胞內(nèi)蛋(dàn)白質含(hán)水量(liáng)高，容易變性。另(lìng)一方(fāng)麵高溫水蒸(zhēng)汽(qì)對蛋白(bái)質(zhì)有高度(dù)的穿(chuān)透力，從(cóng)而加速(sù)蛋(dàn)白(bái)質變性(xìng)而(ér)迅速死亡(wáng)。

a.巴(bā)氏(shì)消毒(dú)法：有些(xiē)食物會因高溫(wēn)破(pò)壞營養成分(fēn)或(huò)影響質量(liáng)，如牛奶(nǎi)，醬(jiàng)油，啤(pí)酒等，所(suǒ)以隻能(néng)用較低(dī)的溫(wēn)度(dù)來殺死其中的(dí)病(bìng)原(yuán)微(wēi)生物，這(zhè)樣既保持(chí)食(shí)物的(dí)營養和風味，又進行了消(xiāo)毒，保證(zhèng)了食(shí)品(pǐn)衛生(shēng)。該法(fǎ)一(yī)般在(zài)62°C，30分鐘(zhōng)既可(kě)達到(dào)消毒(dú)目的(dí)。

　　b.煮(zhǔ)沸(fèi)消(xiāo)毒法：直接將要消毒(dú)的物品放(fàng)入(rù)清水中(zhōng)，煮(zhǔ)沸(fèi)15分(fēn)鐘(zhōng)，即(jí)可殺(shā)死(sǐ)細菌的(dí)全(quán)部(bù)營(yíng)養和部分(fēn)芽(yá)孢(bāo)。若在(zài)清水中(zhōng)加(jiā)入1%碳酸鈉或(huò)2%的石炭酸(suān)，則(zé)效果更好(hǎo)。此(cǐ)法適用於(yú)注射器(qì)，毛巾(jīn)及(jí)解(jiě)剖(pōu)用(yòng)具的(dí)消(xiāo)毒(dú)。

　　c.間(jiān)歇滅(miè)菌法：上述兩種方(fāng)法在(zài)常(cháng)壓下，隻能起到(dào)消毒作(zuò)用，而很(hěn)難做到*無菌。若(ruò)采(cǎi)用間歇滅菌的(dí)方法，就(jiù)能殺(shā)滅物(wù)品中所有(yǒu)的微(wēi)生(shēng)物(wù)。具體做法(fǎ)是：將(jiāng)待滅菌(jūn)的物(wù)品加(jiā)熱至100°C，15~30分鐘(zhōng)，殺(shā)死其中的營(yíng)養體。然後冷卻，放入(rù)37°C恒(héng)溫箱中過夜，讓殘(cán)留的(dí)芽孢萌發成營養體。第(dì)2天再(zài)重復上(shàng)述(shù)步(bù)驟(zhòu)，三(sān)次左右，就可達(dá)到滅(miè)菌的(dí)目(mù)的(dí)。此法不需加壓滅菌鍋(guō)，適於(yú)推廣(guǎng)，但(dàn)操作麻煩(fán)，所(suǒ)需時間長。

　　d.加壓(yā)蒸(zhēng)汽滅菌(jūn)法：這(zhè)是發(fā)酵(jiào)工(gōng)業，醫(yī)療保健(jiàn)，食品檢測和微(wēi)生物學實驗室(shì)中zui常用的一(yī)種(zhǒng)滅菌(jūn)方法(fǎ)。它適用於各(gè)種(zhǒng)耐(nài)熱(rè)，體積(jī)大(dà)的培養基(jī)的滅菌，也適用(yòng)於玻璃(lí)器皿(mǐn)，工作服(fú)等(děng)物(wù)品的(dí)滅菌。

　　加(jiā)壓(yā)蒸汽滅菌(jūn)是(shì)把待(dài)滅(miè)菌的(dí)物(wù)品放(fàng)在一(yī)個(gè)可(kě)密閉(bì)的(dí)加(jiā)壓蒸汽(qì)滅(miè)菌(jūn)鍋中(zhōng)進行的(dí)，以(yǐ)大(dà)量蒸汽(qì)使(shǐ)其中壓力升高。由於蒸汽壓的(dí)上(shàng)升，水(shuǐ)的沸點也(yě)隨之(zhī)提高(gāo)。在(zài)蒸汽(qì)壓達到1.055公斤(jīn)/厘米2時，加(jiā)壓蒸汽(qì)滅(miè)菌(jūn)鍋內的溫度(dù)可達到121°C。在這(zhè)種情況(kuàng)下(xià)，微(wēi)生(shēng)物(wù)（包括芽孢(bāo)）在(zài)15~20分(fēn)鐘(zhōng)便會(huì)被(bèi)殺(shā)死(sǐ)，而(ér)達到滅(miè)菌(jūn)目的。如滅(miè)菌(jūn)的對象是(shì)砂(shā)土，石(shí)蠟(là)油等麵積大，含菌(jūn)多，傳熱差的物品，則應適當(dāng)延長(cháng)滅菌(jūn)時間。

　　在(zài)加(jiā)壓蒸(zhēng)汽(qì)滅(miè)菌中(zhōng)，要(yào)引(yǐn)起注意的一(yī)個(gè)問題是，在(zài)恒(héng)壓(yā)之(zhī)前，一定(dìng)要排盡(jìn)滅菌鍋(guō)中的冷(lěng)空氣(qì)，否則(zé)表上的(dí)蒸(zhēng)汽壓與(yǔ)蒸汽溫(wēn)度(dù)之間(jiān)不具對應(yīng)關(guān)係，這樣會大(dà)大降低滅(miè)菌(jūn)效果(guǒ)。

３）影響滅菌的因素(sù)

　　a.不同的(dí)微(wēi)生(shēng)物或(huò)同(tóng)種微(wēi)生物的不(bù)同(tóng)菌(jūn)齡(líng)對(duì)高(gāo)溫的敏感(gǎn)性不(bù)同(tóng)。多(duō)數微(wēi)生物的(dí)營養(yǎng)體(tǐ)和病(bìng)毒在50~65°C，10分(fēn)鐘(zhōng)就(jiù)會(huì)被殺(shā)死；但各種孢(bāo)子，特別(bié)是芽孢(bāo)zui能抗(kàng)熱，其中(zhōng)抗熱(rè)性(xìng)zui強的是嗜熱脂(zhī)肪芽孢杆菌，要(yào)在121°C，12分鐘才被殺死(sǐ)。對同種(zhǒng)微生(shēng)物(wù)來講，幼齡菌比(bǐ)老(lǎo)齡(líng)菌(jūn)對(duì)熱(rè)更(gēng)敏(mǐn)感。

　　b.微生(shēng)物的數量多少顯(xiǎn)然會影響滅菌的效果(guǒ)，數量越多(duō)，熱死時(shí)間越長。

　　c.培養基的成分(fēn)與組成(chéng)也(yě)會(huì)影(yǐng)響滅(miè)菌(jūn)效果(guǒ)。一般地講，蛋白質，糖或脂(zhī)肪存在(zài)，則(zé)提高(gāo)抗(kàng)熱性，pH在7附(fù)近，抗(kàng)熱性zui強(qiáng)，偏向(xiàng)兩(liǎng)極(jí)，則抗熱(rè)能力(lì)下(xià)降，而(ér)不同的鹽類可(kě)能(néng)對(duì)滅菌(jūn)產生不(bù)同的影(yǐng)響；固體培養基要比液(yè)體培養(yǎng)基(jī)滅(miè)菌時間(jiān)長(cháng)。

４）滅(miè)菌對(duì)培養(yǎng)基成(chéng)分的(dí)影響

　　a.pH值普遍(biàn)下降。

　　b.產生混濁或沉(chén)澱，這主要是(shì)由於一些離子發生化(huà)學反(fǎn)應(yīng)而產生混濁或(huò)沉澱(diàn)。例(lì)如Ca+2與PO4-3化合(hé)，就(jiù)會(huì)產生磷酸(suān)鈣(gài)沉(chén)澱(diàn)。

　　c.不(bù)少培養(yǎng)基顏(yán)色加(jiā)深(shēn)。

　　d.體(tǐ)積(jī)和(hé)濃度有所(suǒ)變化(huà)。

　　e.營養成分(fēn)有時受到破(pò)壞。

２，輻射(shè)

　　利用輻射(shè)進行滅(miè)菌消(xiāo)毒(dú)，可(kě)以避免高溫滅(miè)菌(jūn)或化學(xué)藥劑(jì)消(xiāo)毒的(dí)缺點，所(suǒ)以(yǐ)應(yīng)用(yòng)越(yuè)來(lái)越廣，目前主(zhǔ)要(yào)應用在以下幾(jī)個(gè)方(fāng)麵：

　　１）接種室，手(shǒu)術室，食(shí)品(pǐn)，藥物(wù)包(bāo)裝室(shì)常(cháng)應用紫外(wài)綫殺菌。

　　２）應(yīng)用β射(shè)綫(xiàn)作食品表麵(miàn)殺菌(jūn)，γ射綫用於食品(pǐn)內部(bù)殺(shā)菌。經輻射後的食(shí)品，因大量微生物(wù)被殺滅，再用(yòng)冷凍保藏，可使保存(cún)期延長。

３，過濾(lǜ)

　　采用(yòng)機械(xiè)方法，設計一種濾孔(kǒng)比細(xì)菌還小的(dí)篩子(zǐ)，做成(chéng)各種過(guò)濾器。通(tōng)過(guò)過濾，隻讓液(yè)體培養基從篩子(zǐ)中(zhōng)流下，而把各(gè)種微生(shēng)物(wù)菌體留在(zài)篩(shāi)子上麵，從而達到(dào)除菌(jūn)的目的。這種滅菌方法適用於一(yī)些對(duì)熱不穩定(dìng)的體積小的液體培(péi)養(yǎng)基的滅菌以及(jí)氣(qì)體(tǐ)的滅菌。它的(dí)zui大優點是不破壞培養基中各(gè)種(zhǒng)物質的(dí)化(huà)學(xué)成分。但是(shì)比細(xì)菌還小的(dí)病毒(dú)仍(réng)然(rán)能(néng)留(liú)在液(yè)體培(péi)養基(jī)內，有(yǒu)時(shí)會給(gěi)實驗(yàn)帶來(lái)一定的(dí)麻煩(fán)。